Peroxydase (source de raifort) Synonyme : Peroxyde d'hydrogène oxydoréductase ;PRH

La peroxydase de raifort (HRP) est isolée des racines du raifort (Amoracia rusticana) et appartient au groupe des ferroprotoporphyrines des peroxydases.Le HRP se combine facilement avec le peroxyde d'hydrogène (H2O2).Le complexe [HRP-H2O2] résultant peut oxyder une grande variété de donneurs d’hydrogène :
Donateur + H2O2 → Donneur oxydé + 2 H2O
HRP oxydera divers substrats (voir tableau 1) :
• Chromogène
• Chimiluminescent (comme le luminol ou l'isoluminol)
• Fluorogène (comme la tyramine, l'acide homovanillique ou l'acide 4-hydroxyphénylacétique)
HRP est un polypeptide à chaîne unique qui contient quatre ponts disulfure.La HRP est une glycoprotéine qui contient 18 % de glucides.La composition glucidique est constituée de galactose, d'arabinose, de xylose, de fucose, de mannose, de mannosamine et de galactosamine, en fonction de l'isozyme spécifique.

HRP est un marqueur largement utilisé pour les immunoglobulines dans de nombreuses applications d'immunochimie différentes, notamment l'immunotransfert, l'immunohistochimie et l'ELISA.La HRP peut être conjuguée aux anticorps par plusieurs méthodes différentes, notamment le glutaraldéhyde, l'oxydation au périodate, via des liaisons disulfure, ainsi que via des agents de réticulation dirigés par des amino et des thiols.La HRP est le marqueur le plus recherché pour les anticorps, car il est le plus petit et le plus stable des trois marqueurs enzymatiques les plus populaires (peroxydase, β-galactosidase, phosphatase alcaline) et sa glycosylation conduit à une liaison non spécifique plus faible.Une revue des méthodes de conjugaison du glutaraldéhyde et du périodate a été publiée.

La peroxydase est également utilisée pour la détermination du glucose4 et des peroxydes en solution.Plusieurs publications, 6 à 24 thèses, 25 à 29 et mémoires 30 à 46, ont cité l'utilisation du P8375 dans leurs protocoles de recherche.