Phosphatase alcaline (ALP)
Description
La phosphatase alcaline est dérivée d'une souche recombinante d'E. coli qui porte le gène TAB5.L'enzyme catalyse la déphosphorylation des extrémités 5' et 3' des phosphomonoesters d'ADN et d'ARN.En outre, il hydrolyse le ribose, ainsi que les désoxyribonucléoside triphosphates (NTP et dNTP).La phosphatase alcaline TAB5 agit sur les extrémités saillantes de 5 pieds, enfoncées de 5 pouces et émoussées.La phosphatase peut être utilisée dans de nombreuses applications de biologie moléculaire, telles que le clonage ou le marquage des extrémités de sondes pour éliminer les extrémités phosphorylées de l'ADN ou de l'ARN.Dans les expériences de clonage, la déphosphorylation empêche l’ADN plasmidique linéarisé de s’auto-ligaturer.Il peut également dégrader les dNTP non incorporés dans les réactions PCR afin de préparer une matrice pour le séquençage de l'ADN.L'enzyme est complètement et irréversiblement inactivée par chauffage à 70°C pendant 5 minutes, rendant ainsi inutile l'élimination de la phosphatase avant la ligature ou le marquage final.
Usage
1. La phosphatase alcaline couplée à des protéines (anticorps, streptavidine, etc.) peut identifier spécifiquement les molécules cibles et peut être utilisée dans la détection ELISA, WB et histochimique ;
2. La phosphatase alcaline peut être utilisée pour déphosphorer l'extrémité 5' de l'ADN ou de l'ARN afin d'empêcher l'auto-liaison ;
3. L'ADN ou l'ARN déphosphorylé ci-dessus peut être marqué par des phosphates radiomarqués (via la polynucléotide kinase T4).
Structure chimique
spécification
| Articles de test | Caractéristiques |
| Activité enzymatique | 5U/μL |
| Activité endonucléase | Non-détecté |
| Activité d'Exonuuclease | Non-détecté |
| Activité de coupure | Non-détecté |
| Activité RNase | Non-détecté |
| ADN d'E.coli | ≤1copie/5U |
| Endotoxine | Test LAL, ≤10EU/mg |
| Pureté | ≥95 % |
Transport et stockage
Transport:Ambiant
Stockage :Conserver à 2-8°C
Re-test recommandéVie:2 ans
