Prémélange de sonde RT-qPCR rapide en une étape-UNG
Numéro de catalogue : HCR5143A
Le kit de sonde RT-qPCR en une étape (FOR FAST) est un kit de détection rapide RT-qPCR basé sur une sonde, adapté à la PCR quantitative simple ou multiplex utilisant l'ARN comme matrice (comme le virus à ARN).Ce produit utilise une nouvelle génération d'ADN polymérase Taq modifiée par des anticorps et une transcriptase inverse dédiée en une étape, avec un tampon optimisé pour une amplification rapide, qui a une vitesse d'amplification plus rapide, une efficacité et une spécificité d'amplification plus élevées.Il prend en charge l'amplification équilibrée en monoplex et en multiplex d'échantillons à faible et haute concentration en peu de temps.
Composants
1. Tampon 5×RT-qPCR (U+)
2. Mélange d'enzymes (U+)
Remarques:
un.Le tampon 5×RT-qPCR (U+) comprend dNTP et Mg2+;
b.Le mélange d'enzymes (U+) comprend la transcriptase inverse, l'ADN polymérase Hot Start Taq, l'inhibiteur de RNase et l'UDG ;
c.Utilisez des embouts sans RNase, des tubes EP, etc.
Avant utilisation, mélangez soigneusement le tampon 5×RT-qPCR (U+).S'il y a des précipitations après décongélation, attendez que le tampon revienne à température ambiante, mélangez et dissolvez-le, puis utilisez-le normalement.
Conditions de stockage
Le produit est expédié avec de la neige carbonique et peut être stocké à -25~-15℃ pendant 1 an.
Instructions
1. Réaction Système
| Composants | Volume (20 μL réaction) |
| 2 × tampon RT-qPCR | 4μL |
| Mélange d'enzymes (U+) | 0,8 μL |
| Amorce avant | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Apprêt inversé | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Sonde TaqMan | 0,05 ~ 0,25 μM |
| Modèle | X µL |
| Eau sans RNase | jusqu'à 25μL |
Remarques : Le volume de réaction est de 10 à 50 μL.
2. Protocole de cyclisme (Snorme)
| Faire du vélo étape | Temp. | Temps | Cycles |
| Transcription inversée | 55 ℃ | 10 minutes | 1 |
| Dénaturation initiale | 95 ℃ | 30 secondes | 1 |
| Dénaturation | 95 ℃ | 10 secondes | 45 |
| Recuit/Extension | 60 ℃ | 30 secondes |
| Protocole de cyclisme (Rapide) Faire du vélo étape |
Temp. |
Temps |
Cycles |
| Transcription inversée | 55 ℃ | 5 minutes | 1 |
| Dénaturation initiale | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Dénaturation | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Recuit/Extension | 60 ℃ | 10 s |
Remarques:
un.La température de transcription inverse est comprise entre 50 ℃ et 60 ℃, l'augmentation de la température contribue à amplifier les structures complexes et les modèles à haute teneur en CG ;
b.La température d'hybridation optimale doit être ajustée en fonction de la valeur Tm de l'amorce et sélectionner le temps le plus court pour la collecte du signal de fluorescence en fonction de l'instrument PCR en temps réel.
Remarques
Veuillez porter les EPI nécessaires, comme une blouse de laboratoire et des gants, pour assurer votre santé et votre sécurité !
