ADN polymérase Robustart Taq

L'ADN polymérase Robustart Taq est une ADN polymérase à démarrage à chaud.Ce produit peut non seulement mieux inhiber la réaction non spécifique provoquée par l'hybridation non spécifique des amorces ou l'agrégation des amorces au cours du processus de préparation et d'amplification du système PCR.Par conséquent, il a une excellente spécificité et est plus efficace pour l’amplification de modèles à faible concentration, et il convient à la réaction d’amplification PCR multiplexée.De plus, ce produit a une très bonne applicabilité et des résultats d’amplification stables peuvent être obtenus dans différents types de réactions PCR.

Composants

1.ADN polymérase Robustart Taq de 5 U/μL

2.10 × PCR Buffer II (sans Mg²+) (facultatif)

3.25 mM de MgCl₂(facultatif)

* 10 × PCR Buffer II (sans Mg²+) ne contient pas de dNTP ni de Mg²+, veuillez ajouter des dNTP et du MgCl₂lors de la préparation du système réactionnel.

Applications recommandées

1.Amplification rapide.

2.Amplifications multiples.

3.Amplification directe du sang, des écouvillons et d’autres échantillons.

4.Détection des maladies respiratoires.

Condition de stockage

-20°C pour un stockage à long terme, doit être bien mélangé avant utilisation, éviter les cycles de congélation-dégel fréquents.

*Si des précipitations surviennent après réfrigération, c'est normal ;il est recommandé d'équilibrer à température ambiante avant de mélanger et d'utiliser.

Définition de l'unité

Une unité active (U) est définie comme la quantité d'enzyme qui incorpore 10 nmoles de désoxyribonucléotide dans un matériau insoluble dans l'acide à 74 °C pendant 30 minutes en utilisant de l'ADN de sperme de saumon activé comme matrice/amorce.

Contrôle de qualité

1.Pureté électrophorétique SDS-PAGE supérieure à 98 %.

2.Sensibilité d'amplification, contrôle de lot à lot, stabilité.

3.Aucune activité nucléase exogène, aucune endonucléase exogène ou contamination par exonucléase

Instructions

Configuration de la réaction

Remarques:

1) une.Le tampon ne contient pas de dNTP et de Mg²+, veuillez ajouter des dNTP et du MgCl₂lors de la préparation du système réactionnel.

2)b.Si elles sont utilisées pour la qPCR/qRT-PCR, des sondes fluorescentes doivent être ajoutées au système réactionnel.Habituellement, une concentration finale d’amorce de 0,2 µM donnera de bons résultats ;si les performances de la réaction sont médiocres, la concentration de l'amorce peut être ajustée dans la plage de 0,2 à 1 µM.La concentration de la sonde est généralement optimisée dans la plage de 0,1 à 0,3 μM.Des expériences de gradient de concentration peuvent être réalisées pour trouver la meilleure combinaison d’amorce et de sonde.

Protocole de cyclage thermique

Remarques

1.Le taux d’amplification de l’ADN polymérase rapide ne doit pas être inférieur à 1 kb/10 s.Le taux de montée et de descente de la température, le mode de contrôle de la température et l'efficacité de la conduction thermique des différents instruments de PCR varient considérablement, il est donc recommandé d'optimiser les conditions de réaction optimales pour l'instrument de PCR rapide spécifique.

2.Le système est hautement adaptable, avec une spécificité et une sensibilité plus élevées.

3.Convient pour une utilisation comme réactifs de détection PCR haute sensibilité et peut être utilisé dans des réactions d'amplification PCR multiplex.

4.Activité polymérase 5′→3′, activité exonucléase 5′→3′ ;pas d'activité exonucléase 3′→5′ ;pas de fonction de relecture.

5.Convient aux tests qualitatifs et quantitatifs de PCR et RT-PCR.

6.L'extrémité 3' du produit PCR est A, qui peut être directement clonée dans un vecteur T.

7.La méthode en trois étapes est recommandée pour les amorces à basses températures d’hybridation ou pour l’amplification de fragments de plus de 200 pb.