2×PCR Master Mix (sans colorant)
PCR Master Mix est une sorte de solution prémélangée PCR conventionnelle prête à l'emploi, comprenant la Taq ADN polymérase, le mélange dNTP MgCl2 et un tampon optimisé.Pendant la réaction, seules l’amorce et la matrice peuvent être ajoutées pour l’amplification, ce qui simplifie grandement les étapes opérationnelles de l’expérience.Ce produit contient d'excellents stabilisants et peut être conservé 3 mois à 4℃.Le produit PCR présente une saillie 3′-dA et peut être facilement cloné dans le vecteur T.
Conditions de stockage
Le produit doit être stocké à -25℃~ -15℃ pendant deux ans.
Caractéristiques
| Fidélité (vs Taq) | 1× |
| Démarrage à chaud | No |
| Surplomb | 3′-A |
| Polymérase | Taq ADN polymérase |
| Format de réaction | SuperMix ou Master Mix |
| Vitesse de réaction | Standard |
| type de produit | Mélange maître PCR (2×) |
Instructions
1.Système de réaction
| Composants | Taille (μL) |
| ADN du modèle | Approprié |
| Amorce 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Amorce 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mélange maître PCR | 25 |
| ddH2O | À 50 |
2.Protocole d'amplification
| Étapes du cycle | Température (°C) | Temps | Cycles |
| Pré-dénaturation | 94 ℃ | 5 minutes | 1 |
| Dénaturation | 94 ℃ | 30 secondes | 35 |
| Recuit | 50-60 ℃ | 30 secondes | |
| Extension | 72 ℃ | 30-60sec/ko | |
| Prolongation finale | 72 ℃ | 10 minutes | 1 |
Remarques:
1) Utilisation du modèle : 50 à 200 ng d’ADN génomique ;0,1 à 10 ng d’ADN plasmidique.
2) mg2+concentration : Ce produit contient 3 mM de MgCl2 adapté à la plupart des réactions PCR.
3) Température de recuit : Veuillez vous référer à la valeur théorique Tm des Primers.La température de recuit peut être réglée à 2 à 5 ℃ inférieure à la valeur théorique de l'amorce.
4) Temps d'extension : Pour l'identification moléculaire, 30 sec/ko sont recommandés.Pour le clonage de gènes, 60sec/ko est recommandé.
Remarques
1.Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables pour l'opération.
2.Pour la recherche uniquement !
