2×PCR Super Mix (avec colorant)
2 × PCR Master Mix contient de la Taq ADN polymérase, des dNTP et d'autres composants requis par la PCR.Le Master Mix est stable 3 mois à 4℃ avec nos stabilisants personnalisés.La solution pré-mélangée est optimisée pour la PCR conventionnelle et prête à l'emploi en ajoutant une matrice d'ADN et des amorces.Les produits PCR peuvent être chargés directement pour l’électrophorèse avec le colorant bleu de bromophénol préchargé.Les produits amplifiés contiennent une saillie 3'-dA et peuvent être facilement clonés dans le vecteur T.Le 2×PCR Master Mix simplifie la procédure PCR et réduit la contamination.
Conditions de stockage
Les produits doivent être stockés entre -25℃~-15℃ pendant 2 ans.
Caractéristiques
| Fidélité (vs Taq) | 1× |
| Démarrage à chaud | No |
| Surplomb | 3'-A |
| Polymérase | Taq ADN polymérase |
| Format de réaction | SuperMix ou Master Mix |
| Vitesse de réaction | Standard |
| type de produit | Mélange maître PCR (2x) |
Instructions
1.Système de réaction
| Composants | Volume(μL) |
| ADN du modèle | Approprié |
| Amorce 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Amorce 2 (10 μmol/L） | 2 |
| 2 × mélange maître PCR | 25 |
| ddH2O | à 50 |
2.Protocole d'amplification
| Étapes du cycle | Température (°C) | Temps | Cycles |
| Dénaturation initiale | 94 | 5 minutes | 1 |
| Dénaturation | 94 | 30 secondes | 35 |
| Recuit | 50-60 | 30 secondes | |
| Extension | 72 | 30-60 secondes/ko | |
| Prolongation définitive | 72 | 10 minutes | 1 |
Note:
1) Utilisation du modèle : 50 à 200 ng d’ADN génomique ;0,1 à 10 ng d'ADN plasmidique.
2) mg2+concentration : Ce produit contient 3 mM de MgCl2, adapté à la plupart des réactions PCR.
3) Température de recuit : Veuillez vous référer à la valeur théorique Tm des amorces.La température de recuit peut être réglée à 2 à 5 ℃ inférieure à la valeur théorique de l'amorce.
4) Temps d'extension : Pour l'identification moléculaire, 30 sec/ko sont recommandés.Pour le clonage de gènes, 60 secondes/ko sont recommandées.
Remarques
1.Les produits PCR avec 2× PCR Master Mix ne conviennent pas à l’électrophorèse sur gel de polyacrylamide.
2.Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables pour l'opération.
3.Il est utilisé UNIQUEMENT à des fins de recherche !
