Bst 2.0 ADN polymérase (sans glycérol, haute densité)
L'ADN polymérase V2 de Bst est dérivée de l'ADN polymérase I de Bacillus stearothermophilus, qui a une activité ADN polymérase 5′ → 3 ′ et une forte activité de remplacement de chaîne, mais aucune activité exonucléase 5′ → 3 ′.La Bst DNA Polymerase V2 convient parfaitement au déplacement de brin, à l'amplification isotherme LAMP (amplification isotherme médiée par boucle) et au séquençage rapide.Cette Bst ADN polymérase V2 est capable d'inhiber l'activité de l'ADN polymérase à température ambiante, de sorte qu'elle puisse être utilisée et que le système réactionnel puisse être formulé à température ambiante, empêchant une amplification non spécifique et améliorant l'efficacité de la réaction, et cette version peut être lyophilisé.De plus, il est capable de libérer son activité à des températures élevées, éliminant ainsi le besoin d’une étape d’activation distincte.
Composants
| Composant | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ADN polymérase V2 (sans glycérol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| Tampon 10×HC Bst V2 | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 3×10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2×1,5 ml | 2×10 ml |
Applications
1.Amplification isotherme LAMP
2.Réaction de déplacement simple brin d'ADN
3.Séquençage de gènes à GC élevée
4.Séquençage de l'ADN au niveau du nanogramme.
Condition de stockage
Transport sous 0°C et stockage entre -25°C~-15°C.
Définition de l'unité
Une unité est définie comme la quantité d'enzyme qui incorpore 25 nmoles de dNTP dans un matériau insoluble dans l'acide en 30 minutes à 65°C.
Réaction de la LAMPE
| Composants | 25 µLSystème |
| Tampon 10×HC Bst V2 | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP (10 mM chacun) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Vert (25×)a | 1,0 μL |
| Mélange d'apprêtb | 6 μL |
| Bst ADN polymérase V2 (sans glycérol) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Modèle | × µL |
| ddH₂O | Jusqu'à 25 µL |
Remarques:
1) une.SYTOTM 16 Vert (25×) : Selon les besoins expérimentaux, d'autres colorants peuvent être utilisés comme substituts ;
2)b.Mélange d'amorces : obtenu en mélangeant 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB et d'autres volumes.
Réaction et condition
1 × Tampon HC Bst V2, la température d'incubation est comprise entre 60°C et 65°C.
Inactivation thermique
80°C, 20 minutes.
