Réactif de libération d'échantillon
Le réactif de libération d’échantillon est destiné aux scénarios de diagnostic moléculaire POCT.Pour les deux systèmes d’amplification directe LAMP et d’amplification directe PCR, il n’est pas nécessaire d’extraire les acides nucléiques.Le lysat brut de l'échantillon peut être directement amplifié, le gène cible peut être détecté avec précision, le temps de détection de l'échantillon peut être encore raccourci, ce qui correspond parfaitement aux exigences d'application du POCT moléculaire.Il convient aux écouvillons nasaux, aux écouvillons de gorge et à d’autres types d’échantillons.Les échantillons traités peuvent être directement utilisés pour la détection PCR quantitative par fluorescence en temps réel ou par LAMP, et les mêmes résultats que les méthodes d'extraction conventionnelles peuvent être obtenus sans opérations compliquées d'extraction d'acide nucléique.
Conditions de stockage
Transporter et conserver à température ambiante.
Contrôle de qualité
Détection fonctionnelle – qPCR quantitative : le système de réactif de libération d'échantillon de 800 μl a été amplifié
avec 1 000 copies de nouveau pseudovirus, un échantillon sur écouvillon nasal, ce qui donne des courbes d'amplification similaires etValeurs ΔCt à ± 0,5 Ct.
Procédure expérimentalerés
1. Prenez 800 μl de réactif de libération d'échantillon et étalez la solution de lyse dans un tube d'échantillonnage de 1,5 mL.
2. Prenez l'écouvillon nasal ou l'écouvillon de gorge avec l'écouvillon ; Procédure d'échantillonnage par écouvillon nasal : prenez l'écouvillon stérile et placez-le dans les narines, avancez lentement jusqu'à environ 1,5 cm de profondeur, tournez doucement 4 fois contre la muqueuse nasale pendant plus de 15 secondes. , puis répétez la même opération sur l'autre cavité nasale avec le même écouvillon. Procédure d'échantillonnage par écouvillon de gorge : prenez l'écouvillon stérile et essuyez doucement et rapidement les amygdales pharyngées et la paroi pharyngée arrière 3 fois.
3.Placez immédiatement l'écouvillon dans le tube de prélèvement.La tête de l'écouvillon doit être tournée et mélangée dans la solution de stockage pendant au moins 30 secondes pour garantir que l'échantillon est complètement élué dans le tube d'échantillonnage.
4. Incubation à température ambiante (20 ~ 25 ℃) pendant 1 min, la préparation du tampon de lyse est terminée.
5. Les systèmes RT-PCR et RT-LAMP de 25 μl étaient compatibles avec une quantité de 10 μl d'ajout de modèle pour les expériences de détection.
Remarques
1. La quantité minimale de lysat direct d'échantillon correspondant à un seul écouvillon peut être ajustée à 400 µl, qui peut être ajustée en fonction des besoins de test.
2. Une fois l'échantillon traité par le réactif de libération d'échantillon, il est recommandé d'effectuer la phase suivante du test dès que possible, l'intervalle d'attente étant de préférence inférieur à 1 heure.
3. Le pH du lysat de l'échantillon est acide et le système de détection doit disposer d'un certain tampon.Il convient à la plupart des détections de fluorescence PCR, RT-PCR et LAMP avec tampon pH, mais ne convient pas à la détection colorimétrique LAMP sans tampon.
