Kit d'extraction d'ADN/ARN viral
Ce kit convient à l'extraction rapide d'ADN/ARN viral de haute pureté à partir d'échantillons tels que des écouvillons nasopharyngés, des écouvillons environnementaux, des surnageants de culture cellulaire et des surnageants d'homogénéisation de tissus.Le kit est basé sur une technologie de purification par membrane de silice qui élimine le besoin d’utiliser des solvants organiques phénol/chloroforme ou une précipitation fastidieuse à l’alcool pour extraire l’ADN/ARN viral de haute qualité.Les acides nucléiques obtenus sont exempts d'impuretés et prêts à être utilisés dans des expériences en aval telles que la transcription inverse, la PCR, la RT-PCR, la PCR en temps réel, le séquençage de nouvelle génération (NGS) et le Northern blot.
Conditions de stockage
Conserver à 15 ~ 25 ℃ et transporter à température ambiante
Composants
| Composants | 100RXNS |
| Tampon CV | 50 ml |
| Tampon RW | 120 ml |
| ddH2 O sans RNase | 6 ml |
| Colonnes d'ARN FastPure | 100 |
| Tubes de prélèvement (2 ml) | 100 |
| Tubes de prélèvement sans RNase (1,5 ml) | 100 |
CV tampon :Fournir un environnement pour la lyse et la liaison.
Tampon RW :Élimine les protéines résiduelles et autres impuretés.
ddH2O sans RNase :Éluer l’ADN/ARN de la membrane dans la colonne de centrifugation.
Colonnes d'ARN FastPure :Adsorbe spécifiquement l’ADN/ARN.
Tubes de prélèvement 2 ml :Recueillir le filtrat.
Tubes de prélèvement sans RNase 1,5 ml :Recueillir l'ADN/ARN.
Applications
Écouvillons nasopharyngés, écouvillons environnementaux, surnageants de culture cellulaire et surnageants d'homogénéisation de tissus.
Mater préparé soi-mêmeials
Embouts de pipettes sans RNase, tubes à centrifuger de 1,5 ml sans RNase, centrifugeuse, mélangeur vortex et pipettes.
Processus d'expérimentation
Effectuez toutes les étapes suivantes dans une enceinte de biosécurité.
1. Ajouter 200 μl de l'échantillon dans un tube à centrifuger sans RNase (compléter avec du PBS ou 0,9% NaCl en cas d'échantillon insuffisant), ajouter 500 μl de Buffer VL, bien mélanger au vortex pendant 15 à 30 secondes et centrifuger. brièvement pour recueillir le mélange au fond du tube.
2. Placer les colonnes FastPure RNA dans des tubes de prélèvement de 2 ml.Transférez le mélange de l’étape 1 vers les colonnes FastPure RNA, centrifugez à 12 000 tr/min (13 400 × g) pendant 1 min et jetez le filtrat.
3. Ajoutez 600 μl de Buffer RW aux colonnes FastPure RNA, centrifugez à 12 000 tr/min (13 400 × g) pendant 30 secondes et jetez le filtrat.
4. Répétez l'étape 3.
5. Centrifugez la colonne vide à 12 000 tr/min (13 400 × g) pendant 2 min.
6. Transférez soigneusement les colonnes FastPure RNA dans un nouveau tube de prélèvement sans RNase de 1,5 ml (fourni dans le kit) et ajoutez 30 à 50 μl de ddH2O sans RNase au centre de la membrane sans toucher la colonne.Laisser reposer à température ambiante pendant 1 min et centrifuger à 12 000 tr/min (13 400 × g) pendant 1 min.
7. Jetez les colonnes FastPure RNA.L'ADN/ARN peut être utilisé directement pour des analyses ultérieures, ou conservé à -30 ~ -15 °C pendant une courte période ou à -85 ~ -65 °C pendant une période plus longue.
Remarques
Pour usage de recherche uniquement.Ne pas utiliser dans les procédures de diagnostic.
1. Équilibrer les échantillons à température ambiante au préalable.
2. Les virus sont hautement contagieux.Veuillez vous assurer que toutes les précautions de sécurité nécessaires sont prises avant l’expérience.
3. Évitez la congélation et la décongélation répétées de l’échantillon, car cela pourrait entraîner une dégradation ou une réduction du rendement de l’ADN/ARN viral extrait.
4. L'équipement préparé soi-même comprend des pointes de pipettes sans RNase, des tubes à centrifuger de 1,5 ml sans RNase, une centrifugeuse, un mélangeur vortex et des pipettes.
5. Lorsque vous utilisez le kit, portez une blouse de laboratoire, des gants jetables en latex et un masque jetable et utilisez des consommables sans RNase pour minimiser le risque de contamination par la RNase.
6. Effectuez toutes les étapes à température ambiante, sauf indication contraire.
Mécanisme et flux de travail
